蛋白表達(dá)（proteinexpression）即重組蛋白表達(dá)是指將目的基因重組復(fù)制到人工媒介（vector）然后引入受體細(xì)胞或無細(xì)胞系統(tǒng)，在異源系統(tǒng)中表達(dá)蛋白質(zhì)的技術(shù)。

蛋白質(zhì)表達(dá)可以解決天然蛋白質(zhì)難以獲得的問題。20世紀(jì)70年代首次建立異源基因蛋白表達(dá)后，成功表達(dá)了成千上萬的重組蛋白，有效地促進(jìn)了生物技術(shù)和生物醫(yī)學(xué)研究和產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展。

目的：

通過蛋白質(zhì)表達(dá)，首先可以獲得難以從自然來源獲得的蛋白質(zhì)。

其次，蛋白質(zhì)表達(dá)產(chǎn)物批量大，純度高，不僅有利于目的蛋白的分析，而且大大降低了成本。

更重要的是，通常選擇的重組蛋白表示宿主細(xì)胞的生物安全性很高，從而避免了一些病源宿主的潛在生物安全風(fēng)險(xiǎn)。

方式：

主要包括基因片段復(fù)制、導(dǎo)入表達(dá)系統(tǒng)、誘導(dǎo)表達(dá)、產(chǎn)品凈化分析等過程。

歸類：

蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)一般可分為：

1、核表達(dá)系統(tǒng)：大腸桿菌是最常見的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)，具有遺傳背景清晰、繁殖方便、成本低、表達(dá)高等優(yōu)點(diǎn)，但缺乏翻譯修改機(jī)制，不適合糖基化或特殊選擇點(diǎn)切割修改蛋白質(zhì)表達(dá)，適用于相對分子量小于100k，翻譯后修改不影響蛋白質(zhì)表達(dá)的結(jié)構(gòu)和功能?？莶菅挎邨U菌也可用于蛋白質(zhì)表達(dá)，其優(yōu)點(diǎn)是代謝表達(dá)能力強(qiáng)，蛋白酶活性低，也逐漸受到重視。

2、真核表達(dá)系統(tǒng)：翻譯后可實(shí)現(xiàn)一定程度的糖基化，更接近真核蛋白的自然活性。它主要包括在內(nèi)。①酵母表達(dá)系統(tǒng)（常見的紅酵母、釀造酵母等），酵母可以高密度醇厚，翻譯后可以修改，具有原核和真核宿主細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)，也是一個很好的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)。②昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)：外源基因通過桿狀病毒媒介轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞表達(dá)，是真核蛋白的高表達(dá)系統(tǒng)，適用于膜蛋白、大分子質(zhì)量蛋白、蛋白激酶等原核系統(tǒng)中難以表達(dá)的蛋白質(zhì)。③哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)：哺乳動物細(xì)胞的翻譯和裝飾效率遠(yuǎn)高于酵母和昆蟲細(xì)胞系統(tǒng)，其結(jié)構(gòu)和功能更接近天然真核蛋白，但表達(dá)量低，成本高。

3、無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)：目的蛋白可以直接從粒子和PCR產(chǎn)物中表達(dá)，表達(dá)系統(tǒng)是來自大腸桿菌、小麥胚胎、兔網(wǎng)紅細(xì)胞等的無細(xì)胞提取物。無細(xì)胞蛋白表達(dá)的優(yōu)點(diǎn)是可以表達(dá)其他系統(tǒng)難以表達(dá)的產(chǎn)物、高通量和自動化，但表達(dá)量低，成本高。

寫到最后:

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