熒光共振能量轉(zhuǎn)移（Fluorescence resonance energy transfer, FRET)

瑩光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET)這是一個非輻射能量越遷移的過程，供體激發(fā)態(tài)能量通過分子間電偶的相互影響轉(zhuǎn)移到受體激發(fā)態(tài)。這個過程沒有光子的參與，所以是非輻射的。這種分析方法具有快速、敏感和簡單的優(yōu)點。

FRET試驗中使用的染料可以相同。但是在大多數(shù)應(yīng)用中，實際上使用了不同的染料。簡單來說，瑩光共振能量的轉(zhuǎn)移是一對偶極子從供體(染料1)轉(zhuǎn)移到受體(染料2)的過程，當(dāng)供體基團激起時。一般來說，供體（Donor）瑩光基團的發(fā)射光譜與受體（Acceptor）基團的吸收光譜有一定的重疊。當(dāng)這兩個瑩光基團之間的距離合適時(10–100?)），可以觀察到瑩光能量從供體向受體的轉(zhuǎn)移。能量轉(zhuǎn)移的方法取決于受體的化學(xué)結(jié)構(gòu)：

1.被轉(zhuǎn)化為分子的振動，也就是說，能量轉(zhuǎn)移的瑩光消失了。(受體是猝光劑)

2.發(fā)射比受體本身更強的瑩光特性，導(dǎo)致次級熒光光譜的紅移。(受體是瑩光發(fā)射體)。

供體基團（EDANS）和接受基因（DABCYL）與HIV蛋白酶天然底物連接均勻，當(dāng)?shù)孜餂]有斷開時，DABCYL可以淬滅EDANS，然后無法檢測到瑩光。在HIV-1蛋白酶斷開后，EDANS不再被DABCYL淬滅，隨后可以檢測到EDANS瑩光。通過EDANS熒光強度的變化，可以監(jiān)測蛋白酶抑制劑的有效性。 

FRET肽是研究肽酶非特異性的方便工具。由于其反應(yīng)過程可以連續(xù)監(jiān)測，為檢測酶活性提供了方便的方法。供體/受體對肽鍵水解后產(chǎn)生的光澤可以衡量納摩爾級濃度的酶活性。當(dāng)FRET肽完整時，它顯示了內(nèi)部的閃光突然消失，但當(dāng)供體/受體對面的任何肽鍵破裂時，它就會釋放出閃光，這種閃光可以持續(xù)檢測，然后可以定量分析酶的活性。

寫到最后:

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