5.哪些因素會(huì)影響到多肽純度的測(cè)試結(jié)果

答：多肽純度檢驗(yàn)結(jié)果的關(guān)鍵要素有很多，涉及：流動(dòng)相體系、色譜柱型號(hào)規(guī)格、柱溫、波長(zhǎng)及色譜儀的性能參數(shù)，各項(xiàng)有所不同都會(huì)導(dǎo)致最終結(jié)果有偏差。

6.反相色譜分離純化后，如何去除產(chǎn)品中流動(dòng)相產(chǎn)品中的TFA，乙腈等雜質(zhì)？

答：凍干的方法基本上可以去掉大部分TFA和乙腈，只需要不高于準(zhǔn)許范疇，這種方法是簡(jiǎn)便、高效的。對(duì)TFA的含量要求較高的部分藥物肽凍干的辦法通常不能完全滿足要求，必須進(jìn)行專用的轉(zhuǎn)鹽或脫鹽。

7.多肽通常都有哪些鹽的形式？根據(jù)哪種方法轉(zhuǎn)鹽或脫鹽？

答：大部分多肽基本都是在TFA體系下分離純化的，因此多肽以TFA鹽的形式zui多，另一方面藥物肽通常有醋酸鹽及鹽酸鹽的形式，少部分藥物肽會(huì)出現(xiàn)一些特殊的鹽形式。轉(zhuǎn)鹽方式多數(shù)為離子交換法和HPLC法，而脫鹽可以使用透析袋和超濾膜。

8.TFA在緩沖液中是否只發(fā)揮調(diào)控PH的功效？TFA的濃度越高基線漂移越嚴(yán)重，那是不是說TFA的濃度在緩沖液PH允許的范圍內(nèi)越低就越好？

答：

(1)TFA有著類似離子對(duì)的功效，通常濃度在0.05-0.1%，過高的濃度，會(huì)讓溶液偏酸，長(zhǎng)期使用會(huì)影響到柱子使用壽命。

(2)另外TFA遏制硅膠表面硅醇基，能夠改善堿性樣品的峰型。有時(shí)0.1%TFA分離不樂觀?？梢赃x擇把濃度增加到0.2%。不過要注意使用后盡快清洗色譜柱。

寫到最后:

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