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定制合成 Custom synthesis
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肽鏈N端乙?;?,C端酰胺化修飾
化學(xué)合成的肽鏈往往帶上分散的氨基和分散的羧基。而肽的序列往往意味著了母本蛋白的序列,為了與母本蛋白更加貼近,肽尾端往往需要封閉,即N端乙?;?/span>C端酰胺化,那樣修飾的目地是降低多肽的總正電荷,減少多肽的溶解度,另外還可以使肽模擬它在母本蛋白中α氨基和羧基的初始情況。
大家需要了解,公司在收到的顧客定制多肽要求,假如顧客沒(méi)有標(biāo)明需要N端乙酰化,或是C端的酰胺化;一切正常流程生成的多肽鏈,N端和C端都是外露的。因此,假如需要對(duì)N端進(jìn)行乙酰化修飾或?qū)?/span>C端進(jìn)行酰胺化修飾,在提交訂單時(shí)要確立。由于生成一旦完畢,則不可以再進(jìn)行改動(dòng)。
多肽磷酸化修飾
磷酸化多肽關(guān)鍵指肽鏈中的Ser、Tyr和Thr殘基的主鏈甲基被修飾成酸式磷酸酯多肽。磷酸化多肽是研究蛋白磷酸化過(guò)程的必不可少的專用工具,因而研究蛋白及多肽的磷酸化反映并明確完善簡(jiǎn)便的生成線路就變得十分關(guān)鍵。目前為止,多肽的磷酸化修飾關(guān)鍵有后磷酸化法和單個(gè)法二種生成方法。后磷酸化法是多肽序列在樹(shù)脂上生成完后,再對(duì)在其中的Ser、Tyr或Thr的主鏈甲基進(jìn)行磷酸化;單個(gè)規(guī)律是將適度維護(hù)的磷酸化氨基酸立即引進(jìn)到多肽序列中,這類方法較后磷酸化法實(shí)際操作更加簡(jiǎn)便,早已變成多肽磷酸化修飾的關(guān)鍵方法。
熒光標(biāo)記時(shí),肽和修飾標(biāo)記的染劑中間需要加一個(gè)間距嗎?
大部分生物活性染料歸屬于大分子量脂環(huán)氨基酸,在多肽序列中引進(jìn)這一類大中型分子結(jié)構(gòu),為了防止多肽與標(biāo)識(shí)中間產(chǎn)生相互影響,保持蛋白的構(gòu)象以及分子生物學(xué)特異性,固拓生物生物推薦引進(jìn)一個(gè)可彎折的間距區(qū),例如Ahx,。Ahx是一個(gè)帶有6碳分子結(jié)構(gòu)的環(huán)形結(jié)構(gòu),能夠保持熒光標(biāo)識(shí)的可靠性。假如在生成中不加上這一個(gè)間距區(qū),FITC很容易結(jié)合多肽序列中的半胱氨酸殘基或是賴氨酸殘基。
一般狀況下,生物素、FITC一類的染劑既能夠標(biāo)記在蛋白的氨基端還可以標(biāo)記在蛋白的羧基端。殊不知,為了在最短期內(nèi)內(nèi),最方便快捷又高效地合成多肽,固拓生物推薦顧客挑選標(biāo)記在氨基端。由于一個(gè)多肽的合成往往是以羧基端剛開(kāi)始的,這樣一來(lái),氨基端修飾便變成最后一個(gè)階段,不用再進(jìn)行特別的結(jié)合功效。相反,羧基端修飾需要附加的階段,因而過(guò)程更為繁雜。
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